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HKE378 NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease(核酸酶)

英文名稱:NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease

貨 號 :HKE378

規(guī) 格 :50μg/盒

用途:核酸酶

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商品詳細
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產品名稱:NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease
中文名稱:NLS-Cas9(D10A,H840A) 核酸酶

產品編號與包裝規(guī)格:

編號產品名稱規(guī)格產品介紹價格
HKE378NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease50μg/盒crispr基因編輯(核酸酶)1575

產品描述:
      CRISPR/Cas9 是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適應性免疫防御系統(tǒng),改造后的 II 型 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)在基因的定點修飾中展現(xiàn)出巨大的應用潛能。脫靶效應是目前 CRISPR/Cas9 技術應用 的一個難題,在基因編輯應用中,可能會出現(xiàn)難以預測的后果。
      本制品是 spCas9 Nuclease 的一個突變體。Cas9 Nuclease 具有兩個切割活性中心,從而實現(xiàn)在 sgRNA 靶序列特定位點引入 DNA 雙鏈 斷 裂 ( DSB ) 。 NLS-Cas9 (D10A,H840A) Nuclease 在 Cas9Nuclease 基礎上突變兩個切割活性中心,使其只具有靶 DNA 結合活 性,但無切割活性,并且通過在蛋白兩端加了核定位信號(NLS),可使蛋白進入細胞核內發(fā)揮作用。

產品特點:純蛋白體系,避免 CRISPR 基因敲除時引入質?;虿《靖蓴_;

保存體系:10mM Tris-HCl,300mM NaCl,0.1mM EDTA,50% Glycerol, PH7.4,25℃。

保存溫度:-20℃保存,或-80℃長期保存。

NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease 產品包裝(A包裝):

產品組成體積
NLS-Cas9(D10A,H840A) Nuclease(0.1μg/μl)500 μL
10×Reaction Buffer1 ml

質量保證:經多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測僅可見清晰單一的目的條帶,純度達 95%;內毒素含量< 0.1EU/μg;qPCR 方法檢測無大腸桿菌基因組殘留;無 RNase、核酸內、外切酶污染。

體外切割體系(20μL):

dsDNA200 ng
sgRNA200 ng
Cas9(D10A, H840A) Nuclease200ng
10×Reaction Buffer2 μl
RNase Free WaterTo 20 μl

37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min 
注:在反應體系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl,防止RNase 污染。

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* 為 Cas9(D10A) Nickase,能在與 sgRNA 靶序列互補的 DNA 鏈上產生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以減少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9(H840A) Nickase,能在 sgRNA 靶序列所在的DNA 鏈上產生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以減少意外的脫靶基因修飾。

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