產(chǎn)品名稱:逆轉(zhuǎn)錄酶(反轉(zhuǎn)錄酶) II
英文名稱:Reverse Transcriptase II
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:
編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
HKE126-01B | 逆轉(zhuǎn)錄酶(反轉(zhuǎn)錄酶) II | 10000U×5 | Reverse Transcriptase II | 5180 |
產(chǎn)品描述:環(huán)凱Reverse Transcriptase II是對(duì)M-MuLV(RNase H-)進(jìn)行基 因工程改造,表達(dá)并純化的高溫逆轉(zhuǎn)錄酶,比M-MuLV(RNaseH-)提 高了熱穩(wěn)定性。該酶可以在高溫條件下(50~60℃)進(jìn)行cDNA 第一鏈 的合成,高溫條件下有利于打開復(fù)雜RNA模板鏈。該酶最佳反應(yīng)溫 度為50℃,具有熱穩(wěn)定相強(qiáng),靈敏度高,特異性高,聚合能力強(qiáng)等 優(yōu)點(diǎn)。
逆轉(zhuǎn)錄酶 用途:
1)1st Strand cDNA的合成;
2)cDNA Probe的制備;
3)RT-PCR反應(yīng)以及Real Time RT-PCR反應(yīng)。
逆轉(zhuǎn)錄酶 使用建議:
用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或者購(gòu)買已經(jīng)證明無核 酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的 污染。
確保所用試劑及超純水中無RNA酶污染。
試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中,所有管子確保扣嚴(yán)。
純化過的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以 上成分會(huì)干擾第一鏈cDNA的合成反應(yīng)??刹捎靡掖汲恋鞷NA的方法 去除掉痕量污染物。
為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的RNA模板。
最快可達(dá)2kb/min,需要提高反轉(zhuǎn)錄效率或模板含量較低時(shí)可以 適當(dāng)延長(zhǎng)反轉(zhuǎn)錄時(shí)間。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品反應(yīng)Buffer中含有高濃度的DTT,低溫下或者凍 融可能會(huì)導(dǎo)致沉淀析出,請(qǐng)恢復(fù)至室溫并混勻后使用。
Reverse Transcriptase II 產(chǎn)品包裝(A包裝):
反轉(zhuǎn)錄酶 質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測(cè)僅可見清晰 單一目的條帶。PCR 方法檢測(cè)無大腸桿菌 DNA 殘 留,無核酸內(nèi)、外切酶污染,無 RNA 酶污染。
反轉(zhuǎn)錄酶 活性定義:以Poly(rA)?Oligo(dT)為模板/引物,在50℃、 10 分鐘條件下,摻入1 nmol 的[3H] dTTP 所需要的 酶量定義為1 個(gè)活性單位。