環(huán)凱生物針對細(xì)胞系的營養(yǎng)需求研發(fā)出多種經(jīng)典的細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基，已有DMEM、MEM、RPMI1640、DMEM/F-12等系列細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品，特別添加能有效改善細(xì)胞生長狀態(tài)的營養(yǎng)物質(zhì)和針對不同物種甄選的優(yōu)質(zhì)組分，適合各類哺乳細(xì)胞系的體外培養(yǎng)。

環(huán)凱研發(fā)的細(xì)胞培養(yǎng)基，可根據(jù)以下不同指標(biāo)進(jìn)行配置，滿足各類哺乳細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)：

• 高/低/無-葡萄糖濃度
• 含/不含L-谷氨酰胺或L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（G-MAX）
• 含/不含丙酮酸鈉
• 含/不含酚紅pH指示劑

以下是環(huán)凱關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)系列相關(guān)產(chǎn)品介紹：

細(xì)胞培養(yǎng)基

1、DMEM

DMEM是一種由Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基得到的廣泛使用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基，適用于多種哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)，包括成纖維細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞，以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等細(xì)胞系。

DMEM是一種含各種氨基酸和葡萄糖的細(xì)胞培養(yǎng)基，是在MEM細(xì)胞培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM相比增加了各種成分用量。DMEM分為高糖型（高于4500 mg/L）和低糖型（低于1000 mg/L）。高糖型具有利于細(xì)胞貼壁，適于生長較快、高密度培養(yǎng)等優(yōu)點；低糖型更適合代謝作用較慢、葡萄糖需求低的細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品信息：

2、MEM

MEM細(xì)胞培養(yǎng)基是一種添加了營養(yǎng)物的極限必需培養(yǎng)基（也稱最低必需培養(yǎng)基、最小基本培養(yǎng)基或低限量Eagle培養(yǎng)基），僅含有12種必需氨基酸、L-谷氨酰胺和8種維生素。MEM是一種最基礎(chǔ)、最常用的細(xì)胞培養(yǎng)基，主要應(yīng)用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)，在添加血清后，可用于培養(yǎng)多種單層生長的細(xì)胞，如成纖維細(xì)胞。修改配方后的MEM α則可廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。

產(chǎn)品信息：

3、RPMI 1640

RPMI是洛斯維·帕克紀(jì)念研究所（Roswell Park Memorial Institute）的縮寫，RPMI 1640是該研究所研發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基，1640是培養(yǎng)基代號。開發(fā)RPMI 1640的初衷是用于人白血病細(xì)胞的懸浮或單層培養(yǎng)，后來被發(fā)現(xiàn)也適用于多種哺乳動物細(xì)胞，包括Hela、Jurkat、MCF-7、PC-12、PBMC、星型膠質(zhì)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞，尤其適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，是一種廣泛應(yīng)用的細(xì)胞培養(yǎng)基。

RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基與其他培養(yǎng)基的區(qū)別在于含有還原型谷胱甘肽和高濃度維生素、生物素、維生素B12和對氨基苯甲酸。RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基中的氯化膽堿和肌醇也高于其他細(xì)胞培養(yǎng)基。

產(chǎn)品信息：

4、DMEM/F-12

Ham's F-12細(xì)胞培養(yǎng)基最初用于CHO細(xì)胞的無血清培養(yǎng)，其含有一些傳統(tǒng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基沒有的成分，如腐胺、次黃嘌呤、胸苷、鋅等；在低血清含量下，適用于單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)；添加血清后，也廣泛應(yīng)用于癌細(xì)胞和原代細(xì)胞培養(yǎng)，如大鼠肝細(xì)胞、大鼠前列腺上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、大鼠成肌細(xì)胞和雞胚胎細(xì)胞等。

DMEM/F-12細(xì)胞培養(yǎng)基是由DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基和Ham's F-12細(xì)胞培養(yǎng)基1:1混合而成，在DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加Ham's F-12細(xì)胞培養(yǎng)基，使其含有更為豐富的營養(yǎng)成分和多種微量元素。目前被廣泛用于多種哺乳動物細(xì)胞的生長，包括MDCK、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞和大鼠成纖維細(xì)胞等；同時DMEM/F-12細(xì)胞培養(yǎng)基是無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)，也適用于低血清含量的哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)。

產(chǎn)品信息：

5、M199

M199 細(xì)胞培養(yǎng)基起初用于雞胚成纖維細(xì)胞的營養(yǎng)研究，具有廣泛的物種適用性，特別適用于非轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。M199 細(xì)胞培養(yǎng)基針對廣泛的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，提供多種組分的改良培養(yǎng)基，常用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn)以及小鼠胰腺上皮和大鼠晶狀體組織的原代組織塊體外培養(yǎng)。

產(chǎn)品信息：

細(xì)胞培養(yǎng)基配套試劑

1、HEPES 溶液

作用：pH緩沖劑
HEPES是一種弱酸，中文名字是4-羥乙基哌秦乙硫磺酸，對細(xì)胞無毒性，主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變動。在開放式培養(yǎng)條件下，觀察細(xì)胞時培養(yǎng)基脫離了5% CO2的環(huán)境，CO2氣體迅速逸出，pH迅速升高，若添加了HEPES，此時可以維持pH 7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時需要添加HEPES。

2、L-谷氨酰胺溶液

作用：參與蛋白質(zhì)的合成，也為合成核酸提供碳源，是細(xì)胞的重要能量來源

谷氨酰胺是一種不穩(wěn)定的氨基酸，在中性的水溶液中會自發(fā)降解；需要頻繁地補(bǔ)加L-谷氨酰胺。因而在培養(yǎng)操作過程中可能會出現(xiàn)以下狀況：
      1)頻繁打開蓋子，增加了破壞無菌狀態(tài)的可能性；
      2)過多的追加L-谷氨酰胺，增加了培養(yǎng)基中氨的毒性水平。

解決方案：
      ?選擇不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基，使用前自行添加L-谷氨酰胺。
      ?選擇含有更穩(wěn)定的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺培養(yǎng)基代替。

3、L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液

作用：參與蛋白質(zhì)的合成，也為合成核酸提供碳源，是細(xì)胞的重要能量來源
丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液（二肽谷氨酰胺）在細(xì)胞培養(yǎng)中穩(wěn)定存在，可高壓滅菌，釋放毒性氨少；在細(xì)胞內(nèi)會被氨肽酶所水解，產(chǎn)生L-谷氨酰胺和L-丙氨酸；因此在大部分細(xì)胞系統(tǒng)中二肽谷氨酰胺就可以像L-谷氨酰胺一樣有效地被利用。二肽谷氨酰胺是L-谷氨酰胺最優(yōu)替代物，它無需適應(yīng)；既可用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，也適合于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。

4、丙酮酸鈉

作用：能量來源
丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源，在葡萄糖不足時，細(xì)胞會代謝丙酮酸鈉，從而保證細(xì)胞可以更好的生長。由于細(xì)胞在糖酵解途徑中將丙酮酸鈉作為中間代謝物，因此它不是所有細(xì)胞培養(yǎng)所需要的添加劑，屬于非必需組分。

5、非必須氨基酸溶液

作用：促進(jìn)細(xì)胞增值代謝，降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用
非必須氨基酸溶液包含L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天門冬酰胺、L-天門冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種非必須氨基酸（NEAA）。添加NEAA能有效改善細(xì)胞培養(yǎng)基配比，降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝，是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的添加劑之一。

6、胰蛋白酶

作用：使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞
胰蛋白酶是一種絲氨酸水解酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切段，水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，破壞細(xì)胞間的連接，從而使組織或貼壁細(xì)胞離散成單個細(xì)胞。胰酶作用及溶解的最佳pH為8-9，配制胰酶溶液應(yīng)將液體調(diào)至pH 8左右，充分溶解，過濾除菌。過濾后可以再調(diào)至pH 7 .5，也可不調(diào)。一般常用胰酶工作濃度為0.25%，而半貼壁細(xì)胞或?qū)σ让该舾械募?xì)胞常采用低濃度（0.05%）的胰酶進(jìn)行細(xì)胞消化。

7、Cell counting kit-8

作用：測定細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性中的細(xì)胞活力
細(xì)胞增殖試驗廣泛應(yīng)用于評估細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子，如生長因子、細(xì)胞因子、有絲分裂物和藥物，尤其適用于活性細(xì)胞的定量檢測。細(xì)胞計數(shù)試劑盒(CCK-8)可靈敏地測定細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性中的細(xì)胞活力。四唑鹽WST-8 被細(xì)胞內(nèi)的脫氫酶還原生成黃色甲臜產(chǎn)物，可溶于培養(yǎng)基中。細(xì)胞中脫氫酶的活性所產(chǎn)生的甲臜產(chǎn)物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比WST-8靈敏度高于其他四唑鹽，如 MIT、XTT、WTS 或 WST-1。

8、PBS緩沖液

作用：用于消化細(xì)胞前和培養(yǎng)過程中的細(xì)胞的洗滌、溶液配制和其他常規(guī)用途
PBS緩沖液，是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液，主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl，一般作為溶劑，起溶解、保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級解離，緩沖的pH值范圍很廣，而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。還可根據(jù)需要補(bǔ)加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2至PBS溶液中以提供二價陽離子。

產(chǎn)品信息：

胎牛血清

由于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中缺少某些營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子，導(dǎo)致細(xì)胞無法得以生長并維持生長狀態(tài)，無法存活。因此基礎(chǔ)培養(yǎng)基常常需要添加終濃度為5-20%的血清。

添加血清的作用有：

1. 提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)；
2. 提供貼壁和擴(kuò)展因子；
3. 提供激素及各種生長因子；
4. 提供結(jié)合蛋白；
5. 對培養(yǎng)中的細(xì)胞提供某些保護(hù)作用。

產(chǎn)品信息：