米酵酸是由曾被稱為椰毒假單胞菌酵米面亞種(BGC)細菌產(chǎn)生,該菌是唐菖蒲伯克霍爾德菌(BG)的一種致病型。早在1932年,BGC就從椰子發(fā)酵中毒食品中得以分離;我國學(xué)者也于1977年從酵米面中毒食品中分離出來。盡管產(chǎn)米酵酸細菌不乏學(xué)術(shù)關(guān)注,但近年來真正的“成名史”還是得回歸到“東北酸湯子事件”和“廣東河粉事件”,這些食物中毒事件均強調(diào)了“兇手”BGC的高致病性和高死亡率,也突出了檢測該菌的重要性和急迫性。當(dāng)前,主要采用國標方法對BGC進行鑒定,其實驗流程包括:增菌、分離、生化鑒定、毒素培養(yǎng)及基于高效液相色譜法的米酵菌酸檢測,耗時(10-12天)耗力且價格昂貴。這樣的檢測技術(shù)盡管能提供較為準確的可靠結(jié)果,但當(dāng)食物中毒爆發(fā)事件發(fā)生時,很難實現(xiàn)快速檢測;另外,此類技術(shù)也不利于食品安全的常規(guī)大規(guī)模監(jiān)測。為滿足食品安全常規(guī)監(jiān)測的需求,開發(fā)定向識別產(chǎn)米酵酸細菌的快檢技術(shù)至關(guān)重要。分子生物學(xué)技術(shù),如PCR,因其能夠高特異高靈敏地靶向檢測實際樣本中的目標菌且具備時間和經(jīng)濟效益性,在食源性致病菌檢測領(lǐng)域內(nèi)得到了廣泛關(guān)注。國內(nèi)外也已開發(fā)了不少應(yīng)用于BG檢測的PCR或qPCR檢測試劑盒,但在BGC的檢測上開發(fā)力度還不夠,這可歸因于特異性分子靶標的缺乏。
基于此,廣東省科學(xué)院微生物研究所(簡稱:廣微所)吳清平院士團隊基于其豐富的菌種資源庫和全基因組數(shù)據(jù)庫,采用泛基因組分析方法,針對性挖掘出BGC和BG的特異性分子靶標,并據(jù)此建立了常規(guī)PCR及qPCR檢測方法,靶標的特異性和靈敏度都得到了充分驗證(見原文鏈接與專利)。廣東環(huán)凱生物科技有限公司,作為院士成果轉(zhuǎn)換基地,進一步研制出能同時檢測BGC和BG的雙重qPCR試劑盒(詳情請見官網(wǎng)),檢測靈敏度可低至102 CFU/mL,特異性100%,且具備較好的抗干擾性能;在實際樣本檢測中,也展現(xiàn)出了極佳的靈敏度和特異性(均為100%),如表1。同時,該試劑盒已在吉林、遼寧、河南、上海、福建、廣東等省市疾控、檢測機構(gòu)及企業(yè)廣泛使用,獲得使用者的一致好評。總的來說,吳清平院士團隊著眼于守護食品安全,成功自主研發(fā)了快速定向識別產(chǎn)米酵酸細菌的核酸快速檢測試劑盒。這項創(chuàng)新成果的推出,將極大地促進對產(chǎn)米酵酸細菌的廣泛監(jiān)測工作,為國民“餐桌安全”保駕護航。
表1 雙盲實驗檢測食品樣本中的BG和BGC的結(jié)果比較
參考文獻:
1. 原文鏈接:https://doi.org/10.1016/j.foodcont.2023.110233
2. 專利:葉青華, 李兵, 吳清平, 張菊梅, 代京莎, 陳玲, 陳謀通, 薛亮, 丁郁, 王涓, 吳詩, 古其會, 龐銳, 韋獻虎, 張友雄. 唐菖蒲伯克霍爾德菌及其椰毒致病變種特異性新分子靶標及其快速檢測方法. 申請?zhí)枺篊N202210638211.2
來源:微生物安全與健康網(wǎng),作者~鄒晶晶